產(chǎn)品詳情
產(chǎn)品基本信息
品牌與產(chǎn)地
品牌:伯樂(Bio-Rad Laboratories, Inc.),全球領(lǐng)先的生命科學(xué)與臨床診斷產(chǎn)品制造商。
產(chǎn)地:美國(原廠設(shè)計制造,核心高壓模塊與電路系統(tǒng)在美國加州赫拉克勒斯生產(chǎn))。
核心功能
BD LSRFortessa X-50 是一款超高端臺式多色分析型流式細胞儀(High-Parameter Analyzer)。其核心功能是實現(xiàn)的多參數(shù)細胞表型與功能分析。它不具備物理分選(Sorting)能力,但專注于在單細胞水平上解析的復(fù)雜信息。主要功能包括:
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超高維數(shù)據(jù)分析:支持5激光系統(tǒng),最多可同時檢測50個參數(shù)(2個散射光 + 48個熒光),能夠一次性描繪出細胞極其精細的“身份指紋”。
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深層次免疫表型:能夠同時分析數(shù)十種表面標(biāo)志物、趨化因子受體、活化狀態(tài)標(biāo)志物,用于發(fā)現(xiàn)新的細胞亞群(如組織駐留記憶T細胞、先天樣淋巴細胞)。
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全光譜流式(Spectral)兼容性:X-50型號是BD在傳統(tǒng)PMT(光電倍增管)技術(shù)上的巔峰之作,雖然本身是傳統(tǒng)流式,但其高通道數(shù)設(shè)計為與全光譜流式(如BD FACSDiscover S8)進行數(shù)據(jù)比對和驗證提供了基礎(chǔ)。
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高速高通量分析:分析速度可達100,000事件/秒,配合自動進樣器(HTS),可快速處理大量樣本,適用于大規(guī)模單細胞圖譜繪制(如Human Cell Atlas項目)。
技術(shù)特點
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模塊化光學(xué)系統(tǒng)(MOS):這是LSRFortessa系列區(qū)別于FACSCanto的核心。光路不再是完全固定的,而是采用模塊化設(shè)計。用戶可以根據(jù)實驗需求,像搭積木一樣更換不同的濾光片和分光鏡(Dichroic Mirrors),從而自由定義每個檢測器的波長范圍,最大化利用激光能量和熒光染料。
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5激光固態(tài)激發(fā)源:標(biāo)配或可選配5根高功率固態(tài)激光器,覆蓋從紫外到遠紅外的全光譜范圍(355nm UV, 405nm Violet, 488nm Blue, 561nm Yellow-Green, 640nm Red)。這種配置確保了有足夠的“光學(xué)空間”來容納48種熒光染料而不發(fā)生嚴重的光譜重疊。
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高靈敏度PMT陣列:配備了多達30個獨立的高量子效率PMT檢測器。每個檢測器都經(jīng)過精密校準(zhǔn),確保在檢測微弱信號(如轉(zhuǎn)錄因子、磷酸化蛋白)時具有極低的背景噪音。
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數(shù)字信號處理(DSP):全數(shù)字化采集系統(tǒng),支持脈沖寬度(Width)和高度(Height)分析,能有效去除粘連細胞(Doublets),確保單細胞數(shù)據(jù)的純凈度。
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自動化液流控制:智能液流系統(tǒng)能自動調(diào)節(jié)壓力以適應(yīng)不同粘度的樣本(如全血、組織消化液),并自動進行樣本間沖洗,將交叉污染率降至(<0.1%)。
應(yīng)用領(lǐng)域
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高維免疫學(xué)(High-Dimensional Immunology):細胞因子風(fēng)暴研究、腫瘤微環(huán)境(TME)免疫細胞浸潤分析、自身免疫病機制探索。
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單細胞多組學(xué)前端驗證:作為單細胞RNA測序(scRNA-seq)或單細胞ATAC測序(scATAC-seq)的“金標(biāo)準(zhǔn)”驗證工具,用于確認分選群體的純度或驗證測序發(fā)現(xiàn)的表面標(biāo)志物。
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藥物研發(fā)與生物標(biāo)志物發(fā)現(xiàn):在抗體藥物篩選(ADC, BiTE)中,同時評估靶點表達、內(nèi)化效率、殺傷效應(yīng)和免疫調(diào)節(jié)功能。
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干細胞與發(fā)育生物學(xué):多能性標(biāo)志物組合分析、譜系追蹤、罕見干細胞亞群鑒定。
產(chǎn)品圖片
https://www.bdbiosciences.com/dam/bdb/products/instruments/flow-cytometers/lsrfortessa/lsrfortessa-01.png.thumb.1280.1280.png
(圖示:儀器體積較大,通常配備雙顯示器,正面有自動進樣器托盤,側(cè)面有模塊化光學(xué)艙門)
產(chǎn)品參數(shù)
詳細參數(shù)
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參數(shù)類別 |
規(guī)格(5激光30色標(biāo)準(zhǔn)高配) |
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激光器配置 |
5根固態(tài)激光器: |
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檢測參數(shù) |
最多同時檢測 50個參數(shù)(2個散射光 + 48個熒光) |
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檢測器類型 |
30個高靈敏度光電倍增管(PMT) |
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熒光靈敏度 |
FITC ≤ 90 MESF;PE ≤ 45 MESF(典型值,實際優(yōu)于此值) |
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分析速度 |
100,000 事件/秒(實際受樣本濃度限制) |
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樣本壓力 |
低、中、高可調(diào)(適應(yīng)不同細胞類型) |
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樣本體積 |
最小 10 μL(適合珍貴樣本) |
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樣本殘留率 |
< 0.1% |
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自動進樣 |
標(biāo)配或選配HTS(High Throughput Sampler),支持96/384孔板 |
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軟件系統(tǒng) |
BD FACSDiva? Software(必須使用Diva進行復(fù)雜的光路配置和補償) |
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數(shù)據(jù)格式 |
FCS 3.1,支持導(dǎo)出至FlowJo, FCS Express等第三方軟件 |
注意事項
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實驗設(shè)計復(fù)雜性:30色實驗不是簡單的染料疊加。必須進行嚴格的光譜重疊矩陣(Spillover Spreading Matrix, SSM) 計算。在購買前,實驗室必須配備精通流式配色原理(如Fluorochrome Spectra Viewer工具)的專家,否則大量通道的串色(Spillover)會導(dǎo)致數(shù)據(jù)無法解讀。
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樣本制備要求極高:30色抗體染色對樣本的潔凈度、細胞活性、非特異性結(jié)合(Fc Blocking)要求極為苛刻。任何微小的死細胞或碎片都會在30個通道中產(chǎn)生巨大的背景噪音。必須使用高濃度的活力染料(如Live/Dead Fixable染料)和徹底的洗滌步驟。
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開機校準(zhǔn)耗時:雖然儀器穩(wěn)定,但5激光30色配置的開機預(yù)熱和CS&T(Cytometer Setup and Tracking)質(zhì)控流程比普通儀器長(約30-45分鐘)。每日必須運行質(zhì)控微球以驗證所有30個檢測器的性能。
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維護成本:30個PMT和5根激光器的維護成本遠高于普通3激光儀器。紫外激光器(355nm)壽命相對較短(約5,000-8,000小時),更換費用昂貴。
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數(shù)據(jù)存儲壓力:一個30色的FCS文件體積巨大(通常50-100MB/樣本),對電腦硬盤(建議SSD)和服務(wù)器備份空間提出了極高要求。
應(yīng)用與建議
購買建議
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強烈推薦購買場景(必選X-50):
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科研機構(gòu)或國家實驗室:致力于繪制人類細胞圖譜(Human Cell Atlas)或進行系統(tǒng)免疫學(xué)(Systems Immunology)研究。
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腫瘤免疫學(xué)中心:需要同時分析腫瘤細胞、T細胞、B細胞、髓系細胞、基質(zhì)細胞等超過15種細胞類型的復(fù)雜相互作用。
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核心設(shè)施共享平臺(作為旗艦機):需要一臺“鎮(zhèn)場之寶”來滿足PI們最前沿的多色實驗需求,與分選儀(如FACSAria)和光譜儀(如FACSDiscover)形成技術(shù)互補。
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可考慮低配版(如X-20)場景:
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主要做20色以內(nèi)的實驗,且預(yù)算有限。X-20(4激光20色)性價比更高。
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實驗室已有光譜流式細胞儀,購買LSRFortessa僅作為傳統(tǒng)流式的對照和驗證平臺。
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不推薦購買場景:
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臨床常規(guī)檢測:醫(yī)院檢驗科做TBNK或白血病分型,完全不需要30色,購買FACSCanto II或CytoFLEX更經(jīng)濟實用。
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新手實驗室:沒有流式專家坐鎮(zhèn),購買此儀器等于“大炮打蚊子”,且極易因操作不當(dāng)導(dǎo)致光路損壞或數(shù)據(jù)混亂。
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價格標(biāo)準(zhǔn)
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全新機市場參考價(2026年,中國含稅):人民幣 450萬元 - 650萬元。
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價格波動極大,完全取決于激光器和檢測器的數(shù)量:
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基礎(chǔ)配置(3激光10色):約180萬-250萬(但通常不會這樣買LSRFortessa)。
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標(biāo)準(zhǔn)高配(5激光20-25色):約350萬-480萬。
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頂配(5激光30色,含高功率UV激光和全自動進樣器):約550萬-650萬。
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二手/翻新機價格:極其罕見,且風(fēng)險高。若有,價格約200萬-300萬元(需第三方工程師全面檢測UV激光器壽命)。
服務(wù)與保障
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標(biāo)準(zhǔn)保修:1年現(xiàn)場全保(On-site Comprehensive Warranty)。BD工程師上門安裝、調(diào)試復(fù)雜的MOS光路模塊,并提供高級應(yīng)用培訓(xùn)(多色配色設(shè)計)。
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必須購買的延保:BD Care Platinum Program(白金計劃)。對于X-50這種復(fù)雜儀器,強烈建議購買5年延保。價格約為儀器總價的12%-18%/年。包含:
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每季度1次預(yù)防性維護(PM):清潔光學(xué)模塊,檢查激光器功率衰減。
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7x24小時緊急響應(yīng):備件庫中常備昂貴的UV激光模塊。
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性能優(yōu)化服務(wù):定期幫助用戶重新優(yōu)化濾光片配置以適應(yīng)新的染料面板。
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軟件支持:FACSDiva軟件支持復(fù)雜的光路配置(Cytometer Configuration),保修期內(nèi)免費升級。
使用說明書
BD LSRFortessa的操作高度依賴FACSDiva軟件,其硬件手冊極為復(fù)雜。以下為針對30色實驗的特殊操作要點示意圖:
BD LSRFortessa X-50 30色實驗操作核心流程
[實驗前 - 配色設(shè)計(必須在軟件外完成)] 1. 使用BD Fluorescence Spectrum Viewer在線工具 -> 2. 選擇5激光30色 -> 3. 分配染料,確保每個染料在檢測器上的信號,串色最小 -> 4. 導(dǎo)出配色表(Template) [每日開機 - 長流程] 1. 開啟激光器(提前30分鐘預(yù)熱,特別是UV激光) -> 2. 運行CS&T微球 -> 3. 軟件自動生成30個通道的Voltage Target值 -> 4. 運行補償微球(如UltraComp eBeads) -> 5. 在Diva中建立30x30的補償矩陣(Comp Matrix)并保存 [上樣檢測] 1. 加載配色模板 -> 2. 使用低流速預(yù)覽樣本,檢查所有通道是否有信號 -> 3. 切換到高流速采集 -> 4. 實時監(jiān)控“Spillover Spreading”指標(biāo),若某個通道溢出過大,需中止實驗調(diào)整配色 [關(guān)機] 1. 運行“Shutdown”程序(含去離子水沖洗和消毒液浸泡) -> 2. 務(wù)必關(guān)閉UV激光器電源(以延長壽命) -> 3. 關(guān)閉主機
注:完整的使用說明書是一套包含《硬件安裝指南》、《MOS配置手冊》、《FACSDiva高級操作手冊》的文檔集,需從BD官網(wǎng)下載或向工程師索要。



