產(chǎn)品詳情
產(chǎn)品基本信息
品牌與產(chǎn)地
羅氏LightCycler 480 II 384孔熒光定量PCR儀由瑞士羅氏診斷公司(Roche Diagnostics)研發(fā)生產(chǎn)。該儀器屬于德國原裝進(jìn)口的高端精密設(shè)備,其核心部件(如銀質(zhì)熱模塊、光學(xué)棱鏡系統(tǒng))在德國曼海姆工廠制造,代表了羅氏在分子診斷和生命科學(xué)研究領(lǐng)域的工藝水準(zhǔn)。作為羅氏LightCycler系列的第二代旗艦產(chǎn)品,它繼承了該系列在臨床驗(yàn)證和科研穩(wěn)定性方面的深厚基因。
核心功能
該儀器的核心功能是實(shí)現(xiàn)高通量、高精度的實(shí)時(shí)熒光定量PCR(qPCR)檢測(cè)。具體包括:1)絕對(duì)定量與相對(duì)定量:通過標(biāo)準(zhǔn)曲線法或ΔΔCt法精確計(jì)算DNA/RNA的起始拷貝數(shù),動(dòng)態(tài)范圍高達(dá)11個(gè)數(shù)量級(jí);2)高分辨率熔解曲線(HRM)分析:無需探針即可進(jìn)行基因分型、突變掃描和SNP檢測(cè),分辨率可達(dá)0.01℃;3)多重PCR檢測(cè):利用其6個(gè)獨(dú)立光學(xué)通道,可在單孔內(nèi)同時(shí)檢測(cè)多達(dá)6種不同的靶標(biāo)(如FAM、VIC、CY5等染料);4)終點(diǎn)法基因分型:適用于TaqMan探針或雜交探針的終點(diǎn)讀取。
技術(shù)特點(diǎn)
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Therma-Base?熱循環(huán)技術(shù):采用一體成型的純銀加熱模塊,結(jié)合的氣液平衡導(dǎo)熱層,徹底消除了傳統(tǒng)PCR儀的“邊緣效應(yīng)”,確保384個(gè)孔在任意時(shí)間點(diǎn)的溫度均一性達(dá)到±0.1℃,這是獲得高重復(fù)性數(shù)據(jù)(CV<0.3%)的物理基礎(chǔ)。
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全固定光路與冷CCD檢測(cè):采用高強(qiáng)度白色LED固態(tài)光源(壽命>10,000小時(shí))和五棱鏡長(zhǎng)光路設(shè)計(jì),無需移動(dòng)任何機(jī)械部件即可同時(shí)激發(fā)并采集整板所有孔的信號(hào),消除了孔間時(shí)間差。檢測(cè)器采用制冷型CCD(工作溫度≤10℃),有效降低光子噪聲,無需依賴ROX被動(dòng)參比染料進(jìn)行孔間校正。
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極速升降溫:模塊最大升溫速度可達(dá)6.8℃/秒,樣本平均升溫速度達(dá)4.8℃/秒,使得完成40個(gè)循環(huán)的384孔PCR反應(yīng)時(shí)間縮短至40分鐘以內(nèi),大幅提升篩選效率。
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模塊化互換:用戶可在5分鐘內(nèi)自行更換96孔或384孔熱模塊,無需工程師校準(zhǔn),且軟件自動(dòng)識(shí)別模塊類型,實(shí)現(xiàn)了通量的靈活切換。
應(yīng)用領(lǐng)域
該儀器主要應(yīng)用于對(duì)數(shù)據(jù)準(zhǔn)確性和通量有極高要求的場(chǎng)景:1)藥物研發(fā)與生物制藥:細(xì)胞系開發(fā)中的基因表達(dá)分析、病毒載體滴度測(cè)定(如AAV、慢病毒)、工藝驗(yàn)證中的殘留DNA檢測(cè);2)臨床前研究與轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué):大規(guī)模生物標(biāo)志物篩選、伴隨診斷開發(fā)、液體活檢中的ctDNA定量;3)基礎(chǔ)科研:基因表達(dá)譜分析、MicroRNA研究、DNA甲基化分析、病原體高通量篩查;4)農(nóng)業(yè)與食品安全:轉(zhuǎn)基因成分定量、食源性致病菌快速檢測(cè)。
產(chǎn)品圖片
(此處應(yīng)插入羅氏LightCycler 480 II 384孔儀器的正面外觀圖,特征為:銀灰色金屬機(jī)身,正面中央有一個(gè)帶雙向箭頭的圓形按鈕用于進(jìn)板,右側(cè)通常連接一臺(tái)工業(yè)級(jí)電腦顯示器,儀器側(cè)面貼有“LightCycler 480 II”型號(hào)標(biāo)簽。)
產(chǎn)品參數(shù)
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參數(shù)類別 |
詳細(xì)指標(biāo) |
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型號(hào)名稱 |
LightCycler 480 Instrument II (384-well) |
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樣品通量 |
384孔(兼容96孔模塊,需另購) |
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反應(yīng)體積 |
384孔板:3 μL - 20 μL;96孔板:10 μL - 100 μL |
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溫控系統(tǒng) |
Peltier半導(dǎo)體溫控,銀質(zhì)模塊 |
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溫度范圍 |
37℃ - 99℃ |
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溫度準(zhǔn)確性 |
≤ ±0.1℃ (37-99℃) |
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溫度均一性 |
≤ ±0.1℃ (任意時(shí)間點(diǎn)) |
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升溫速度 |
模塊最大:≥6.8 ℃/s;樣本平均:≥4.8 ℃/s |
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降溫速度 |
模塊最大:≥4.4 ℃/s |
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光學(xué)系統(tǒng) |
高強(qiáng)度白色LED固態(tài)光源,冷CCD檢測(cè)器 |
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激發(fā)波長(zhǎng) |
390-710 nm(連續(xù)光譜),5個(gè)激發(fā)濾光片 |
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檢測(cè)通道 |
6個(gè)獨(dú)立檢測(cè)通道(可自由組合達(dá)20種模式) |
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檢測(cè)模式 |
SYBR Green I, TaqMan, Hybridization Probe, SimpleProbe, FRET |
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HRM分辨率 |
≤ 0.01℃ |
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動(dòng)態(tài)范圍 |
11個(gè)數(shù)量級(jí)(1 - 10^10 copies) |
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運(yùn)行時(shí)間 |
40個(gè)循環(huán)(384孔)< 40分鐘 |
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數(shù)據(jù)采集 |
全板同時(shí)采集,無孔間時(shí)間差 |
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軟件平臺(tái) |
LightCycler 480 Software (Version 1.5或更高) |
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物理尺寸 |
約 60 cm (W) × 60 cm (D) × 54.5 cm (H) |
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重量 |
約 55 kg |
注意事項(xiàng)
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耗材兼容性:必須使用羅氏原廠或認(rèn)證的無裙邊/半裙邊矮板(如Roche Cat# 04729749001)。嚴(yán)禁使用高裙邊板或厚底板,否則會(huì)卡住機(jī)械臂或?qū)е鹿鈱W(xué)焦距不準(zhǔn)。
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封膜要求:必須使用光學(xué)級(jí)透明封板膜(如Roche LightCycler 480 Sealing Foil),且封膜時(shí)需確保無褶皺、無氣泡。裸手或戴粉狀手套接觸膜面會(huì)導(dǎo)致熒光淬滅或背景升高。
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環(huán)境溫度:儀器工作環(huán)境需維持在15℃ - 32℃,濕度20%-80%。環(huán)境溫度過高會(huì)導(dǎo)致Peltier冷卻效率下降,儀器報(bào)錯(cuò)“Over Temperature”。
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清潔維護(hù):定期用無水乙醇擦拭進(jìn)板軌道和模塊表面。嚴(yán)禁使用強(qiáng)腐蝕性溶劑(如次氯酸鈉)直接沖洗模塊,會(huì)導(dǎo)致銀質(zhì)表面腐蝕和熱電偶損壞。
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軟件合規(guī):若用于GLP/GMP環(huán)境,需購買并激活“21 CFR Part 11”合規(guī)軟件模塊,否則默認(rèn)研究版軟件不具備完整的審計(jì)追蹤(Audit Trail)功能。
應(yīng)用與建議
購買建議
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適用場(chǎng)景決策:
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必選場(chǎng)景:實(shí)驗(yàn)室日均樣本量超過500個(gè),且需要進(jìn)行HRM分析或復(fù)雜多重檢測(cè)(如5-6色)。LightCycler 480 II的溫控均一性是HRM數(shù)據(jù)的“金標(biāo)準(zhǔn)”。
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慎選場(chǎng)景:如果實(shí)驗(yàn)室主要做簡(jiǎn)單的SYBR Green表達(dá)量檢測(cè),且樣本量少(<96孔/天),建議購買LightCycler 96或更經(jīng)濟(jì)的品牌,因?yàn)?80 II的耗材(384孔板)成本和維護(hù)成本較高。
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升級(jí)建議:若已擁有老款LightCycler 480(I代),升級(jí)至II代主要獲益于白色LED光源(免維護(hù))和更快的運(yùn)行速度,對(duì)于通量瓶頸實(shí)驗(yàn)室是值得的。
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配置選擇:基礎(chǔ)套餐通常包含384孔模塊。如果實(shí)驗(yàn)室同時(shí)有低通量摸索實(shí)驗(yàn),強(qiáng)烈建議加購96孔模塊(貨號(hào):05015243001),實(shí)現(xiàn)“一機(jī)兩用”。對(duì)于自動(dòng)化流水線用戶,需確認(rèn)是否選配“Automation Kit”以兼容機(jī)械臂。
價(jià)格標(biāo)準(zhǔn)
羅氏LightCycler 480 II屬于高端定價(jià)策略,全新機(jī)市場(chǎng)參考價(jià)格區(qū)間為人民幣80萬元至150萬元。
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基礎(chǔ)版(約80萬-100萬):僅包含384孔模塊、基礎(chǔ)軟件和研究版授權(quán)。
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全配版(約120萬-150萬):包含96孔+384孔雙模塊、21 CFR Part 11合規(guī)軟件、自動(dòng)化接口套件、以及首年白金服務(wù)合同。
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影響因素:價(jià)格受匯率、關(guān)稅、代理商層級(jí)(一級(jí)代理 vs 二級(jí))影響大。政府采購或高校集采通常能拿到較低折扣。二手市場(chǎng)(8-10年機(jī)齡)價(jià)格約為20萬-40萬,但需警惕光源衰減(>15000小時(shí))和模塊老化風(fēng)險(xiǎn)。
服務(wù)與保障
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保修政策:全新機(jī)標(biāo)準(zhǔn)整機(jī)保修期為1年。保修范圍涵蓋所有硬件故障(包括光源、CCD、主板、熱模塊)。注意:軟件Bug修復(fù)和技術(shù)支持電話通常終身免費(fèi),但硬件過保后維修費(fèi)用極高(如更換熱模塊約10萬-15萬元)。
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服務(wù)合同(Service Contract):強(qiáng)烈建議購買年度預(yù)防性維護(hù)(PM)合同。羅氏提供銀牌(每年1次上門PM)、(每年2次PM+4小時(shí)響應(yīng))等級(jí)別。年費(fèi)約為設(shè)備購置價(jià)的8%-12%。合同期內(nèi)提供免費(fèi)校準(zhǔn)、性能認(rèn)證(IQ/OQ/PQ)和備件優(yōu)先更換。
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技術(shù)支持:提供7x24小時(shí)熱線支持。羅氏擁有專門的qPCR應(yīng)用科學(xué)家團(tuán)隊(duì),可提供免費(fèi)的上機(jī)培訓(xùn)(通常在新機(jī)安裝時(shí))和定期的高級(jí)應(yīng)用講座(如HRM實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì))。
使用說明書
(此處應(yīng)附上《LightCycler 480 Operator's Manual》或《Quick Start Guide》的封面截圖。該說明書通常為PDF格式,超過200頁,包含詳細(xì)的硬件介紹、軟件操作流程圖、故障代碼查詢表以及維護(hù)日程表。關(guān)鍵章節(jié)包括:“Loading the Sample Plate”、“Creating a New Protocol”、“Analysis of Melting Curves”。)



