產(chǎn)品詳情
產(chǎn)品基本信息
品牌與產(chǎn)地
該產(chǎn)品為羅氏(Roche)品牌旗下的LightCycler 480 II實(shí)時(shí)熒光定量PCR系統(tǒng)。羅氏診斷總部位于瑞士巴塞爾,該儀器系列的核心研發(fā)與高端制造主要位于德國曼海姆(Mannheim)工廠,屬于原裝進(jìn)口的高端分子診斷與生命科學(xué)儀器。在中國市場,由羅氏診斷產(chǎn)品(上海)有限公司負(fù)責(zé)銷售與技術(shù)支持。
核心功能
這是一款專為高通量、高精度需求設(shè)計(jì)的模塊化實(shí)時(shí)熒光定量PCR(qPCR)儀。其核心功能包括:1. 高通量絕對/相對定量:利用384孔模塊,一次性完成多達(dá)384個(gè)樣本的DNA/RNA拷貝數(shù)精確測定,動態(tài)范圍高達(dá)11個(gè)數(shù)量級;2. 高分辨率熔解曲線(HRM)分析:無需探針即可進(jìn)行單核苷酸多態(tài)性(SNP)分型、突變掃描和甲基化分析,分辨率可達(dá)0.01℃;3. 多重基因分型:支持多達(dá)6個(gè)熒光通道(5色檢測+1個(gè)參比),可在單孔內(nèi)同時(shí)檢測多個(gè)靶點(diǎn)(如TaqMan探針、雜交探針、SYBR Green I);4. 快速PCR:利用極速升降溫技術(shù),可在40分鐘內(nèi)完成40個(gè)循環(huán)的擴(kuò)增。
技術(shù)特點(diǎn)
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Therma-Base?熱循環(huán)技術(shù):采用純銀(Ag)材質(zhì)的加熱模塊,結(jié)合獨(dú)特的“熱基架”真空夾層設(shè)計(jì)(內(nèi)部為燈芯狀毛細(xì)管結(jié)構(gòu)),通過蒸發(fā)-冷凝效應(yīng)實(shí)現(xiàn)超高效熱傳導(dǎo)。這徹底消除了傳統(tǒng)PCR儀的“邊緣效應(yīng)”,確保384個(gè)孔在任意時(shí)間點(diǎn)的溫度均一性達(dá)到業(yè)界頂尖的±0.1℃,這是獲得高重復(fù)性HRM數(shù)據(jù)的基礎(chǔ)。
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免掃描冷CCD光學(xué)系統(tǒng):摒棄了移動式光電倍增管(PMT),采用固定式的高強(qiáng)度白色LED固態(tài)光源(壽命>10,000小時(shí))和制冷型CCD相機(jī)。通過精密的五棱鏡光路設(shè)計(jì),無需移動任何機(jī)械部件即可同時(shí)激發(fā)并采集整板所有孔的熒光信號,消除了孔間采集的時(shí)間差,且無需依賴ROX被動參比染料進(jìn)行孔間校正。
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用戶可互換模塊(UIM):用戶可在5分鐘內(nèi)自行手動更換96孔或384孔熱模塊,無需工程師現(xiàn)場校準(zhǔn),軟件自動識別模塊類型,實(shí)現(xiàn)了通量的無縫切換。
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自動化與合規(guī)性:內(nèi)置條碼閱讀器,可配LIMS(實(shí)驗(yàn)室信息管理系統(tǒng))接口和自動進(jìn)樣機(jī)械臂,實(shí)現(xiàn)全流程無人值守。軟件支持21 CFR Part 11合規(guī)模式(需選配),具備完整的審計(jì)追蹤和電子簽名功能。
應(yīng)用領(lǐng)域
主要面向?qū)?shù)據(jù)準(zhǔn)確性、通量及合規(guī)性有嚴(yán)苛要求的場景:
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生物制藥與藥物研發(fā):細(xì)胞系開發(fā)中的基因表達(dá)分析、病毒載體(如AAV、慢病毒)滴度絕對定量、工藝殘留DNA檢測、制劑穩(wěn)定性研究。
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轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)與伴隨診斷:大規(guī)模生物標(biāo)志物篩選、液體活檢(ctDNA)、腫瘤突變負(fù)荷(TMB)檢測、用藥指導(dǎo)基因分型。
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基礎(chǔ)科研:MicroRNA定量、DNA甲基化分析、基因編輯效率驗(yàn)證、病原體高通量篩查(如新冠、HPV分型)。
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法醫(yī)與食品安全:轉(zhuǎn)基因成分(GMO)定量、物種鑒定、食源性致病菌快速檢測。
產(chǎn)品圖片
(此處應(yīng)插入羅氏LightCycler 480 II 384孔儀器的標(biāo)準(zhǔn)外觀圖。典型特征:銀灰色金屬機(jī)身,正面有圓形帶雙向箭頭的進(jìn)板按鈕,右側(cè)通常連接一臺工業(yè)級電腦顯示器,儀器側(cè)面貼有“LightCycler 480 II”型號標(biāo)簽,頂部有可開啟的模塊艙門。)
產(chǎn)品參數(shù)
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參數(shù)類別 |
詳細(xì)指標(biāo)(LightCycler 480 II 384-well) |
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型號名稱 |
LightCycler 480 Instrument II |
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樣品通量 |
384孔(兼容96孔模塊,需另購) |
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反應(yīng)體積 |
5 μL - 20 μL(推薦10 μL) |
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溫控系統(tǒng) |
Peltier半導(dǎo)體溫控,銀質(zhì)模塊 |
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溫度范圍 |
37℃ - 99℃ |
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溫度準(zhǔn)確性 |
≤ ±0.1℃ (37-99℃) |
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溫度均一性 |
≤ ±0.1℃ (任意時(shí)間點(diǎn),整板) |
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升溫速度 |
模塊最大:≥6.8 ℃/s;樣本平均:≥4.8 ℃/s |
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降溫速度 |
模塊最大:≥4.4 ℃/s |
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光學(xué)系統(tǒng) |
高強(qiáng)度白色LED固態(tài)光源,冷CCD檢測器(工作溫度≤10℃) |
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激發(fā)通道 |
5個(gè)(濾光片波長:450, 483, 523, 558, 615 nm) |
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檢測通道 |
6個(gè)獨(dú)立檢測通道(發(fā)射波長:500, 533, 568, 610, 640, 670 nm) |
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檢測模式 |
SYBR Green I, TaqMan, Hybridization Probe, SimpleProbe, FRET |
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HRM分辨率 |
≤ 0.01℃(數(shù)據(jù)采集密度:25次/℃) |
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動態(tài)范圍 |
1 - 10^10 copies(11個(gè)數(shù)量級) |
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運(yùn)行時(shí)間 |
40個(gè)循環(huán)(384孔)< 40分鐘 |
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數(shù)據(jù)采集 |
全板同時(shí)采集(Snapshot技術(shù)),無孔間時(shí)間差 |
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軟件平臺 |
LightCycler 480 Software (Version 1.5或更高) |
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物理尺寸 |
約 57.4 cm (W) × 58.8 cm (D) × 49.7 cm (H) |
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重量 |
約 55.6 kg |
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電源 |
100-240 VAC, 50/60 Hz, 1500 VA |
注意事項(xiàng)
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耗材兼容性:必須使用羅氏原廠認(rèn)證的無裙邊或半裙邊矮板(如貨號04729749001)。嚴(yán)禁使用高裙邊板、厚底板或普通細(xì)胞培養(yǎng)板,否則會卡住機(jī)械臂或?qū)е鹿鈱W(xué)焦距不準(zhǔn),信號全無。
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封膜操作:必須使用光學(xué)級透明封板膜(LightCycler 480 Sealing Foil)。封膜時(shí)需使用專用封板器,確保無褶皺、無氣泡。嚴(yán)禁戴粉狀乳膠手套或裸手接觸膜的光學(xué)面,指紋和粉末會導(dǎo)致熒光淬滅和背景升高。
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環(huán)境與散熱:儀器工作環(huán)境需維持在15℃ - 32℃,濕度20%-80%。儀器背后及兩側(cè)必須預(yù)留至少20cm的散熱空間,嚴(yán)禁堆放物品,否則會導(dǎo)致Peltier過熱保護(hù),報(bào)錯(cuò)“Over Temperature”。
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樣品制備:加樣后必須在板式離心機(jī)中以1500×g(約3000 rpm)離心2分鐘,徹底去除管底氣泡。氣泡會散射激光,導(dǎo)致該孔信號異常(Ct值延遲或無Ct值)。
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軟件操作:進(jìn)行高分辨率熔解曲線(HRM)采集時(shí),電腦CPU占用率極高。嚴(yán)禁在儀器運(yùn)行過程中在連接儀器的電腦上打開其他大型軟件(如Photoshop、多個(gè)Excel)或進(jìn)行數(shù)據(jù)分析,否則會導(dǎo)致數(shù)據(jù)采集丟幀,HRM曲線出現(xiàn)鋸齒狀毛刺。
應(yīng)用與建議
購買建議
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適用場景決策:
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必選場景:實(shí)驗(yàn)室日均樣本量超過300個(gè),且必須做HRM分析(如SNP分型、突變掃描)。LightCycler 480 II的溫控均一性是HRM數(shù)據(jù)的“金標(biāo)準(zhǔn)”,其他品牌儀器很難達(dá)到其區(qū)分雜合子的靈敏度。
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慎選/替代場景:如果實(shí)驗(yàn)室僅做簡單的SYBR Green表達(dá)量檢測,且樣本量少(<96孔/天),建議購買LightCycler 96或更經(jīng)濟(jì)的品牌(如Bio-Rad CFX Opus 96),因?yàn)?80 II的耗材(384孔板)成本和維護(hù)成本較高,屬于“殺雞用牛刀”。
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模塊選擇:如果實(shí)驗(yàn)室同時(shí)有低通量摸索實(shí)驗(yàn),強(qiáng)烈建議加購96孔模塊(貨號:05015243001)。雖然單買較貴(約10-15萬),但能實(shí)現(xiàn)“一機(jī)兩用”,避免購買兩臺儀器。
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配置選型:
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科研版:基礎(chǔ)配置即可,包含384孔模塊和基礎(chǔ)軟件。
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診斷版:需選配“21 CFR Part 11軟件模塊”和“自動化接口套件(Automation Kit)”,以滿足GMP/GLP實(shí)驗(yàn)室對數(shù)據(jù)完整性的要求。
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驗(yàn)證:新機(jī)到貨后,務(wù)必要求工程師使用羅氏原廠“Perbance Verification Kit”進(jìn)行裝機(jī)驗(yàn)證(IQ/OQ),重點(diǎn)確認(rèn)384孔板的孔間CV值是否<0.3%。
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價(jià)格標(biāo)準(zhǔn)
羅氏LightCycler 480 II屬于高端定價(jià)策略,全新機(jī)市場參考價(jià)格區(qū)間為人民幣80萬元至150萬元,具體浮動取決于配置:
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基礎(chǔ)版(約80萬-100萬):僅包含384孔模塊、基礎(chǔ)軟件和研究版授權(quán)。
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全配版(約120萬-150萬):包含96孔+384孔雙模塊、21 CFR Part 11合規(guī)軟件、自動化接口套件、以及首年白金服務(wù)合同。
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二手市場:使用5-8年的二手儀器價(jià)格約為30萬-50萬。重大風(fēng)險(xiǎn)提示:二手儀器的白色LED光源和CCD傳感器可能存在老化(光強(qiáng)衰減),導(dǎo)致HRM性能下降,且羅氏官方通常拒絕為二手儀器提供保修,購買需極度謹(jǐn)慎。
服務(wù)與保障
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保修政策:全新機(jī)標(biāo)準(zhǔn)整機(jī)保修期為1年。保修范圍涵蓋所有硬件故障(包括光源、CCD、主板、熱模塊)。注意:軟件Bug修復(fù)和技術(shù)支持電話通常終身免費(fèi),但硬件過保后維修費(fèi)用極高(如更換整個(gè)熱模塊費(fèi)用約10萬-15萬元)。
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服務(wù)合同(Service Contract):保修期過后,強(qiáng)烈建議購買年度預(yù)防性維護(hù)(PM)合同。羅氏提供不同級別服務(wù)(如Silver、Gold)。服務(wù)通常包含每年2次上門PM、性能認(rèn)證(IQ/OQ/PQ)、4-8小時(shí)現(xiàn)場響應(yīng)及備件優(yōu)先更換。年費(fèi)約為設(shè)備購置價(jià)的8%-12%(約6萬-12萬/年)。
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技術(shù)支持:提供7x24小時(shí)熱線支持。羅氏擁有專門的qPCR應(yīng)用科學(xué)家團(tuán)隊(duì),可提供免費(fèi)的上機(jī)培訓(xùn)(通常在新機(jī)安裝時(shí)完成)和定期的高級應(yīng)用講座(如HRM實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)、多重?zé)晒馀渖桨福?/span>
使用說明書
(此處應(yīng)附上《LightCycler 480 Operator's Manual》或《Quick Start Guide》的封面截圖。該說明書通常為PDF格式,超過200頁,包含詳細(xì)的硬件介紹、軟件操作流程圖、故障代碼查詢表以及維護(hù)日程表。關(guān)鍵章節(jié)包括:“Loading the Sample Plate”、“Creating a New Protocol”、“Analysis of Melting Curves”。用戶可在羅氏官網(wǎng)Support Center憑儀器序列號下載最新版電子手冊。)



